A quantitative real-time RT-PCR assay for European eel tyrosine hydroxylase

Finn-Arne Weltien, C Pasqualini, P Vernier, S Dufour
General and Comparative Endocrinology 142 134-142 (2005)

Abstract
ドーパミン（DA）はヨーロッパウナギのPubetyの阻害に重要な役割を果たしている。しかし、この種においてどのようにドーパミンが神経活動に作用し調整しているのかは知られていない。分子レベルでのDAの阻害を調べるために、Light Cycler systemを利用した定量リアルタイムPCRの測定系を確立し、カテコールアミン生合成の最終酵素であるTHの発現を調べた。内部標準遺伝子に関しては以前にクローニングしたcytichrome bと新しくクローニングしたacidic ribosomal phosphoprotein P0を比較した。さらに測定系の洗練のため、複数のRAN抽出法を試し比較した。ウナギの幼魚の脳を調べたところ、THの発現は嗅球で最も発現しており、次に視索前野を含む終脳、視葉をのぞいた間脳・中脳に発現していた。視葉と脊髄のTHの発現は低く、小脳では発現していなかった。この分布パターンは、免疫組織化学法やRT-PCR、ノーザンブロットから得られた知見と同様であった。今回確立した定量リアルタイムPCR法はDAのPubetyの阻害の機構を理解するのに役立つ新しいツールを提供した。